A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I.V. Levantsevich, S.N. Elansky
Sa mga nagdaang taon, ang estado ng phytosanitary ng mga stock ng patatas at binhi ay kapansin-pansin na lumala sa Belarus. Ang papel na ginagampanan ng ilang mga uri ng mapanganib na mga organismo at ang kanilang ratio sa agrophytocenoses ay nagbago. Ang pagkasasama ng marami hindi lamang laganap na mga sakit (late blight, alternaria, lahat ng mga uri ng scab, bacteriosis, dry fusarium rot) ay nadagdagan, ngunit may bago din, hindi sapat na pinag-aralan, tulad ng sugat na puno ng tubig na nabubulok (Larawan 1). Ang sakit na ito, na nangyayari sa India, Gitnang Asya at iba pang mga timog na bansa, ay nabanggit sa mga rehiyon ng Gomel, Brest, Grodno at Minsk ng Belarus. Tulad ng iba pang mga oomycetes na naninirahan sa lupa, ang P. ultimum ay nagdudulot ng napakalaking pinsala sa mga kundisyon ng labis na kahalumigmigan - sa mga lugar na hindi pinatuyo, sa matagal na pag-ulan (Taylor et al., 2008).
Sa Belarus, ang pagkalat ng sakit ay nabanggit sa mga taon na may mas mataas na temperatura ng lumalagong panahon: sa ilang mga batch ng patatas, 8-10% ng mga tubers ang naapektuhan. Ang sugat na nabubulok na tubers ng tubers ay maaaring maging sanhi ng malaking pinsala, na sanhi ng kawalan ng mga lumalaban na pagkakaiba-iba, bumuo ng mga hakbang sa proteksyon at ang mabilis na pag-unlad ng sakit sa kaso ng pinsala sa tubers (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). Ang sakit ay nakakaapekto lamang sa mga tubers. Sa Russia, ang sugat na puno ng tubig na mabulok ay hindi pa makabuluhan.
Sa gawaing ito, sinisiyasat namin ang 4 na mga uri ng mga causative agents ng sugat na puno ng tubig na nabubulok mula sa mga apektadong tubo ng patatas ng mga varieties na Vektar Belorussian, Skarb at mga dumaraming hybrid sa mga pag-iimbak ng Scientific and Praktikal na Center ng National Academy of Science ng Belarus para sa Potato and Hortikultura (Minsk rehiyon). Ang mga layunin ng pag-aaral ay upang matukoy ang mga species na kabilang sa mga nakahiwalay na isolates, ang kanilang pagkabulok na may kaugnayan sa mga tubo tubers, upang masuri ang paglago sa iba't ibang mga temperatura sa paligid at paglaban sa metalaxyl.
Ang mycelium ng mga isolates ay lumago sa likidong gisantes ng gisantes (180 g ng mga nakapirming berdeng mga gisantes ay pinakuluan ng 10 minuto sa 1 litro ng dalisay na tubig, pagkatapos na ito ay autoclaved ng 30 minuto sa 1 atm); Ang DNA ay nakahiwalay sa bawat pilay. Para sa paghihiwalay ng DNA, ang frozen na mycelium ay na-triturate sa likidong nitrogen, lysed sa CTAB buffer, at pagkatapos ay pinagkaitan ng chloroform. Ang DNA ay nakaimbak sa deionized na tubig sa –20 ° С. Ang pagtatasa ng mga pagkakasunud-sunod ng nucleotide ng mga rehiyon na partikular sa species ng genome (mga rehiyon ng mga nuklear na ribosomal na gen na 18S at 5,8S, pati na rin ang panloob na transcript na intergenic spacer na ITS1), na pinalakas gamit ang mga primer na ITS1 at ITS2 (White, 1990), ay ipinapakita na ang mga pinag-aralan na mga pag-aaral ay kabilang sa Pythium ultimum Trow species. (kasingkahulugan Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo at Kakish).
Lahat ng pinag-aralan ang mga strain na apektado ang mga hiwa ng mga tubo ng patatas ng Gala na inilagay sa mga mahalumiglang kamara. Ang mga madilim na spot ay nabuo sa kanila, na kalaunan ay naging basa-basa na malalim na tumagos na ulser (Larawan 2). Isinasagawa ang impeksyon sa pamamagitan ng paglalagay ng P. ultimum mycelium sa gitna ng hiwa ng tuber.
Ang inoculated tuber discs ay incubated sa + 22 ° C. Ang maximum na rate ng paglago ng apektadong lugar ay nabanggit sa unang 2 araw, pagkatapos ang lugar ng ulser ay nanatiling praktikal na hindi nagbabago.
Ang pattern na ito ay wasto para sa lahat ng pinag-aralan na mga strain.
Ang rate ng paglago ng mga pilas ay tinatayang sa medium ng oat agar sa temperatura na 5, 15, 24, at 34 ° C (Larawan 3). Ang paglago ay sinusunod sa lahat ng temperatura; ang maximum na rate ng paglago ay sinusunod sa 24 ° C (ang 86 mm na tasa ay ganap na lumobong sa loob ng 2 araw). Sa 15 at 34 ° C, ang rate ng paglago ay makabuluhang mas mababa (ang tasa ay tinubuan ng 4 at 3 araw, ayon sa pagkakabanggit).
Sa temperatura ng 15, 24, at 34 ° C, ang mga rate ng paglago ng lahat ng pinag-aralan na mga strain ay hindi naiiba. Sa temperatura na 5 ° C, ang pilay ng P1 ay lumago nang mas mabilis kaysa sa iba (20 mm sa araw na 4), P4 - medyo mas mabagal (10 mm sa araw na 4), ang P2 at P3 ay halos hindi lumago.
Dapat ding pansinin na sa isang temperatura ng 24 ° C na paglago ay nagsimula kaagad pagkatapos magtanim sa isang ulam, sa temperatura na 15 at 34 ° C mayroong pagkaantala sa simula ng aktibong paglago ng 1 araw, at sa 5 ° C - ng 2 araw.
Ang Metalaxyl (at ang isomer mefenoxam) ay kinikilala bilang pinakamabisang gamot para sa pagkontrol ng mga oomycetes sa lupa. Ang Metalaxil ay nakakapasok sa mga tubers at nagbibigay (kahit sa napakababang konsentrasyon) ng kanilang pangmatagalang proteksyon (Taylor et al., 2008, Bruin et al., 1982). Gayunpaman, ang pagiging epektibo ng metalaxyl ay bumababa nang matalim pagkatapos ng paglitaw ng mga lumalaban na mga strain sa mga populasyon. Ang mga galaw na labis na lumalaban ay natagpuan sa maraming mga rehiyon ng Estados Unidos (Taylor et al., 2002). Walang data sa paglaban ng Belarusian P. ultimum na mga strain sa metalaxyl, at samakatuwid ay napagpasyahan na subukan ang kanilang paglaban sa gamot sa gawaing ito.
Ang pag-aaral ng pagkamaramdamin sa fungicide metalaxyl ay isinasagawa sa medium ng oat agar na may pagdaragdag ng fungicide sa iba't ibang konsentrasyon (Pobedinskaya, Elansky, 2014).
Ang pinag-aralan na mga strain ay may ilang mga pagkakaiba-iba sa paglaban sa metalaxyl (Talahanayan 1). Sa gayon, sa isang konsentrasyon ng fungicide na 1 mg / l, ang paglago ng P4 na pilay na tuluyan na tumigil, at ang natitirang mga strain ay lubhang pinabagal. Ang Strains P1 at P2 ay lumago nang napakabagal sa isang daluyan na may konsentrasyong metalaxyl na 10 mg / L. Ang kinakalkula na mabisang konsentrasyon EC50 (ang konsentrasyon ng fungicide na nagpapabagal sa rate ng paglago ng pilay ng 2 beses na kaugnay sa kontrol) para sa lahat ng mga strain ay mas mababa sa 1 mg / L. Samakatuwid, ang lahat ng mga pinag-iimbestahang mga galaw ay madaling kapitan sa metalaxyl; ito ay ipinakita upang maging lubos na epektibo sa pagbawalan ang P. ultimum na paglaki.
Ayon kay Bruin et al. (1982) pagkatapos ng paggamot ng mga halaman sa panahon ng halaman na may metalaxyl sa dosis na 0,5 kg / ha, ang akumulasyon ng fungicide sa tubers ay 0,055 μg / g sa periderm, 0,022 μg / g sa cortical layer, at 0,034 μg / g sa gitnang bahagi ng tuber. Ayon sa aming data, ang konsentrasyong ito ng metalaxyl ay hindi sapat upang mapigilan ang sakit, ngunit maaaring makapagpabagal ng pag-unlad nito.
Kapag lumalaki sa medium ng oat, ang lahat ng mga strain ay nabuo oospores sa monoculture (Larawan 4), na tipikal para sa P. ultimum. Ang pares na paghahati ng mga pinagmanahan ay hindi nagpakita ng mga nakikitang sintomas ng hindi pagkakatugma ng hindi halaman - ang mga tasa ay pantay na natatakpan ng mycelium.
Ang nakuha na data ay nagpapahiwatig na ang P. ultimum ay isang fittopathogen na may kakayahang mabilis na paglaki sa isang malawak na saklaw ng temperatura, kabilang ang sa isang temperatura ng pag-iimbak ng 5 ° C. Ito ay masama sa tisyu ng mga tubers ng patatas at bumubuo ng mga oospore na may kakayahang pang-matagalang mabuhay. Samakatuwid, ang species ay isang mapanganib na phytopathogen na maaaring maging isang banta sa agrikultura at nangangailangan ng karagdagang pag-aaral.
Isinasagawa ang pananaliksik sa suporta ng Russian Science Foundation (proyekto N 14-50-00029).
Talahanayan 1. Sensitivity ng P. ultimum strains sa metalaxyl
Pilitin | Konsentrasyon ng Metalaxyl, mg / l | ||
0 (control) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Tinatayang Ibinigay ang average na data para sa 3 mga sukat.
Ang artikulo ay nai-publish sa journal na "Potato Protection" (Blg. 1, 2017)