E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete phytophthora mga infestan Ang (Mont) de Bary ay nagdudulot ng huli na pamumula, isang mapanganib na sakit ng patatas at kamatis. Isa sa mga pangunahing mapagkukunan ng pangunahing inoculum P. infestans ay makapal na pader na nagpapahinga ng mga istraktura ng reproductive - oospores.
Ang mga hybrid oospore na nabuo bilang isang resulta ng pagtawid sa iba't ibang genetically iba't ibang mga strain ng magulang ay nag-aambag sa isang pagtaas ng pagkakaiba-iba ng genotypic sa populasyon, bilang isang resulta kung saan ang proseso ng pagbagay ng mga strain sa mga bagong uri at inilapat na fungicides ay pinabilis.
Pagbuo ng Oospore P. infestans sa larangan ay nabanggit sa maraming mga bansa sa mundo: Russia (Smirnov et al., 1999), Norway (Hermansen et al., 2002), Sweden (Strömberg et al., 2001), the Netherlands (Kessel et al., 2002) at iba pa mga rehiyon. Ang mga Oospores ay makakaligtas ng higit sa 2 taon sa lupa sa isang mabubuhay na estado (Bødker et al., 2006) at maging sanhi ng impeksyon ng mga halaman pagkatapos ng pag-overtake (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Mas maaga ay ipinakita na ang mga dahon ng mga halaman ng iba't ibang mga baitang ng patatas bush ay may mga pagkakaiba sa paglaban sa huli na pamumula; tataas ito mula sa ibabang dahon hanggang sa itaas. Ang ugali na ito ay hindi nakasalalay sa edad ng dahon, edad ng halaman, o pagkakaiba-iba ng patatas (Vesper et al., 2003). Sa parehong oras, nabigo kami upang makahanap ng data sa mga pagkakaiba sa tindi ng pagbuo ng oospore sa mga dahon ng iba't ibang mga antas ng patatas bush sa panitikan. Gayunpaman, kung umiiral ang mga nasabing pagkakaiba, dapat silang isaalang-alang kapag kumukuha ng mga sample ng dahon para sa pagtatasa ng pagbuo ng oospore at kapag binibigyang kahulugan ang mga resulta na nakuha ng iba pang mga may-akda. Ang layunin ng gawaing ito ay upang pag-aralan ang pagbuo ng mga oospores sa mga hiwalay na dahon ng iba't ibang mga layer ng isang halaman ng patatas, na inilagay sa parehong mga kondisyon sa mahalumigmig na mga silid.
Mga materyales at pamamaraan
Gumamit kami ng 5 mga isolate P. infestans iba't ibang uri ng isinangkot na isinama mula sa mga apektadong sample na dinala mula sa mga rehiyon ng Moscow, Ryazan at Leningrad. Sa mga ito, 3 pares ng mga pinagmanahan ng iba't ibang mga uri ng isinangkot ay napili, na nagbibigay ng masaganang oospores kapag nasubok sa agar oatmeal medium.
Para sa pagsubok, ginamit namin ang mga halaman na walang virus na patatas ng mga sumusunod na varieties na lumago sa isang greenhouse (sa isang peat substrate): maagang Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, kalagitnaan ng maagang Ilyinsky, mid-season Yanka.
Ang mga simpleng dahon mula sa iba't ibang antas ng halaman ng patatas ay napili para sa pagtatasa. Ang tatlong mga dahon ay napili mula sa mas mababang antas (4 na mas mababang mga dahon ng compound), tatlo mula sa itaas (3-4 na mga dahon ng compound sa itaas), at tatlong mga dahon mula sa gitna ng bush. Ang mga simpleng dahon ay pinagtimbang, nakunan ng larawan sa coordinate paper (upang makalkula ang dami at lugar), at pagkatapos ay inilagay baligtad sa ibabaw ng walang tubig na tubig, ibinuhos ng 25 ML sa mga pinggan ng Petri. Pagkatapos ang bawat dahon ay nahawahan ng isang patak ng isang halo-halong suspensyon ng zoosporangia na ihiwalay ang A1 at A2 ng uri ng pagsasama. Para sa tatlong mga dahon na nakolekta mula sa bawat antas, isang inoculum ng tatlong magkakaibang mga pares ng mga ihiwalay ang ginamit. Ang isang dahon ay nahawahan ng isang pinaghalong inoculum ng isang pares ng mga ihiwalay.
Upang maihanda ang isang suspensyon ng zoosporangia, ang mga ihiwalay ng iba't ibang mga uri ng pagsasama ay lumago sa agar oat medium sa loob ng 7 araw, pagkatapos na ang zoosporangia ay hugasan ng sterile distilled water. Ang konsentrasyon ng inoculum ay 5-7 zoospores sa larangan ng view ng microscope sa 80x magnification. Ang bawat dahon ay nahawahan ng isang patak ng isang halo-halong suspensyon ng zoosporangia na ihiwalay ang A1 at A2 mating type.
Sa lahat ng mga eksperimento, 3 dahon ng patatas ang ginamit bawat variant. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog sa loob ng 20 araw sa 18 ° C, ang bawat dahon ay homogenized sa isang lusong na may 2 ML ng dalisay na tubig. Mula sa nagresultang suspensyon, 3 mga sample ang kinuha, kung saan inihanda ang mga paghahanda para sa microscopy.
Sa bawat variant, 180 mga visual na patlang ang napagmasdan, pagkatapos kung saan ang bilang ng mga oospores ay muling kinalkula bawat 1 mm2 ibabaw ng sheet. Ang mga resulta sa pagbibilang para sa bawat variant ay na-average.
Upang makalkula ang agwat ng kumpiyansa (μ) para sa isang antas ng kahalagahan na 0,05, ginamit ang sumusunod na pormula
kung saan s ang karaniwang paglihis, n ang bilang ng mga sukat, t ay ang t-test na pare-pareho para sa isang antas ng kabuluhan na 0,05. Ang lahat ng mga kalkulasyon ay ginaganap sa Excel (pakete ng Microsoft Office).
resulta at diskusyon
Ang inokulasyon ng mga dahon na nakolekta mula sa iba't ibang mga layer ng isang patatas na bush at inilagay sa parehong mga kondisyon sa mga mahalumiglang kamara ay nagsiwalat ng mga pagkakaiba sa tindi ng pagbuo ng oospore. Sa lahat ng pinag-aralan na mga pagkakaiba-iba, ang maximum na bilang ng mga oospore ay nabuo sa pag-inokula ng mga dahon na nakolekta mula sa mas mababang at gitnang mga baitang ng bush. Walang mga makabuluhang pagkakaiba ang natagpuan sa pagbuo ng mga oospore sa mas mababang at gitnang mga dahon.
Ang pinakamaliit na bilang ng mga oospore ay nabuo sa mga dahon ng itaas na layer (Larawan 1).
Sa mga dahon ng mas mababa at gitnang mga baitang, ang maximum na bilang ng mga oospore ay nabuo sa mga iba't-ibang Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar at Osiris. Ang mga ito ay nabuo medyo hindi gaanong masinsinan sa mga dahon ng iba't ibang Yanka. Ang maximum na bilang ng mga oospore sa mga dahon ng itaas na baitang ay na-obserbahan sa mga dahon ng iba't ibang Uladar, na sinusundan ng Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin sa pagbawas ng pagkakasunud-sunod; gayunpaman, hindi lahat ng mga pagkakaiba ay makabuluhan sa istatistika.
Larawan: 1. Pagbuo ng mga oospore sa mga dahon ng iba't ibang mga layer ng patatas bush. Ang mga mas mababa ay mga dahon ng tatlong mas mababang antas ng bush, ang nasa itaas ay 3-4 kumplikadong dahon mula sa tuktok ng halaman, ang gitna ay mula sa gitna ng bush.
Ipinapakita ng mga error bar ang agwat ng kumpiyansa para sa isang antas ng kahalagahan na 0,05.
Sa larangan, ang mga kondisyon ng microclimatic ay nag-aambag din sa pagbuo ng mga oospore sa mas mababang at gitnang mga dahon ng bush: mas mataas na kahalumigmigan, nabawasan ang solar insolation, at pang-araw-araw na pagbagu-bago ng temperatura (Harrison, 1992). Ang nangungunang pag-spray ay nagreresulta sa mas kaunting mga pestisidyo sa ilalim at gitna ng bush. Upang mabawasan ang pagbuo ng mga oospore, dapat gamitin ang mga teknolohiya na nagpapahintulot sa matagumpay na paghahatid ng mga fungicide sa mas mababa at gitnang bahagi ng bush. Mahusay na mga resulta ay maaaring makuha sa pamamagitan ng paggamit ng magulong air sprayers at systemic fungicides na maaaring kumalat sa mga hindi ginagamot na bahagi ng bush.
Ang gawaing ito ay suportado ng Russian Science Foundation (proyekto Blg. 14-50-00029).
Ang artikulo ay nai-publish sa journal na "Potato Protection" (Blg. 2, 2015)